一、标准编号及标准名称
GB/T 47329-2026《胶原蛋白酶活性及纯度检测方法》。
二、标准修订背景
胶原蛋白酶是指在生理条件下特异性水解胶原蛋白三螺旋区域肽键的蛋白酶，包括动物源胶原蛋白酶和微生物源胶原蛋白酶。其中，微生物M9家族来源的基因重组胶原蛋白酶高效且特异性降解胶原蛋白，已广泛应用于动物组织细胞解离、临床伤口清创、疤痕消除及食品工业的胶原蛋白肽制备等生命科学研究领域。随着相关生物技术和产业的快速发展，对以胶原蛋白酶作为核心工具酶的产品质量，特别是其活性与纯度，提出了更高的要求。然而目前国内外尚未有与胶原蛋白酶活性及纯度检测方法相关的任何标准可遵循依照。为促进胶原蛋白酶的生产使用及产业化，满足生命科学研究和生物医药产业的迫切需求，制定胶原蛋白酶活性及纯度检测方法国家标准势在必行。
三、标准主要内容
GB/T 47329—2026《胶原蛋白酶活性及纯度检测方法》规定了胶原蛋白酶的活性及纯度的检测方法，涵盖适用范围、引用文件、胶原蛋白酶定义、检测原理、试剂材料、仪器设备、实验步骤及质量控制等方面。
本标准的主要技术内容与特点体现在以下几个方面：
一是明确了科学、高效的活性检测方法。本标准采用国际通用的胶原蛋白合成底物N-[3-（2-呋喃基）丙烯酰基]-亮氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸（FALGPA）进行胶原蛋白酶活性测定，较其他检测方法灵敏度高、特异性强、操作便捷，可进行96孔板高通量检测，显著提升了检测效率和标准化程度。
二是引入了新颖的纯度检测方法。采用了凝胶过滤层析法（即尺寸排阻色谱法）评价胶原蛋白酶的纯度，依据蛋白质分子量差异进行分离，通过快速蛋白液相色谱系统分析，能够有效区分胶原蛋白酶与其他杂蛋白。本标准详细规定了层析条件、样品处理和数据分析方法，通过积分目标蛋白峰的峰面积占总峰面积的比例，准确计算胶原蛋白酶的纯度。
三是提供了完整、清晰的技术实施路径。本标准对实验用水、试剂纯度、操作步骤（如反应温度、时间控制、底物消耗范围等）均做出了明确规定，并从术语定义、原理阐述，到具体的试剂配制、仪器操作、数据记录和公式计算，均给出了详细说明。同时对酶活性计算中涉及的各个参数及其获取方式进行了清晰说明，示例表格极大增强了标准的可操作性和实用性，便于读者参考和执行。
四、标准实施意义
本标准的发布和实施，一方面为胶原蛋白酶的活性与纯度检测提供了权威、统一的国家标准方法，结束了此前检测方法混杂、检测结果难以对比的局面。另一方面为胶原蛋白酶产品提供了明确的质量控制和检验依据，有助于推动我国胶原蛋白酶相关产业向标准化、高质量方向发展。
